凝膠成像系統適用化學(xué)發(fā)光、多色熒光檢測與普通凝膠,選用高分辨率低照度制冷CCD,結合大口徑高通透電動(dòng)鏡頭,使其能夠捕獲到極微弱的熒光和化學(xué)發(fā)光信號。深度制冷的CCD,較大程度的消除了背景噪聲,可以獲得優(yōu)異的圖像;超大光圈電動(dòng)鏡頭,收集微弱信號;可選的多種熒光光源以及多位電動(dòng)濾光片輪,滿(mǎn)足核酸成像、ECL成像等多種實(shí)驗需求。
凝膠成像系統原理介紹:
樣品在電泳凝膠或者其他載體上的遷移率不一樣,以標準品或者其他的替代標準品相比較就會(huì )對未知樣品作一個(gè)定性分析。這個(gè)就是圖像分析系統定性的基礎。根據未知樣品在圖譜中的位置可以對其作定性分析,就可以確定它的成份和性質(zhì)。
樣品對投射或者反射光有部分的吸收,從而照相所得到的圖像上面的樣品條帶的光密度就會(huì )有差異。光密度于樣品的濃度或者質(zhì)量成線(xiàn)性關(guān)系。根據未知樣品的光密度,通過(guò)于已知濃度的樣品條帶的光密度指相比較就可以得到未知樣品的濃度或者質(zhì)量。這就是圖像分析系統定量的基礎。采用新技術(shù)的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均勻,最大限度的消除了光密度不均造成的對結果的影響。
凝膠成像系統選購要素:
1、核酸電泳凝膠:一般此類(lèi)凝膠成像儀都采用EB染色、紫外激發(fā),而且凝膠較小。推薦采用一般的凝膠成像系統即可完成。
2、蛋白電泳凝膠:一般此類(lèi)凝膠采用考染或銀染,白光透射成像。對于小型凝膠可以選擇一般的凝膠成像系統,但是對于大型凝膠,特別是雙向電泳凝膠,由于CCD拍照成像會(huì )有幾何扭曲,而且透鏡效應也會(huì )導致不同區域的信號強度差異,另外CCD拍照也無(wú)法保證不同凝膠的成像參數保持一致,因此掃描成像是最好選擇。
3、轉印膜:一般轉印膜有比色法顯色、同位素、化學(xué)發(fā)光和熒光等不同檢測手段:
a、比色法顯色就是產(chǎn)生有顏色的條帶或斑點(diǎn),一般采用普通的凝膠成像系統即可;
b、同位素可以采用壓膠片曝光的方法,但是費時(shí)、費力而且容易過(guò)飽和;
c、化學(xué)發(fā)光是目前常用的蛋白印跡的檢測手段,冷CCD拍照成像對這種微弱的光信號是最合適的;
d、熒光染料具有最寬的動(dòng)態(tài)范圍,而且還能夠提供多通路的檢測途徑。
如果需要對鄰近或重疊的目標分子進(jìn)行成像,那么多通道熒光檢測是的選擇。這時(shí)掃描成像絕對是*,這樣選擇不僅僅是因為掃描成像能夠帶來(lái)更高的靈敏度和分辨率,更重要的是,不同通道之間沒(méi)有幾何扭曲,擬合性好。
4、微孔板及其他特殊需求:對于拍照成像而言,由于幾何扭曲的問(wèn)題,對微孔板成像就變得比較復雜了,一般必須一個(gè)專(zhuān)用的校正裝置才可完成。如果凝膠成像系統采用掃描成像一般不需要任何額外附件。